Ultra Nuclease GMP-vaega
Numera pusi: HC2016A
O le UltraNuclease GMP-grade o loʻo faʻaalia ma faʻamamāina i le Escherichia coli (E.coli) e ala ile faʻainisinia ma saunia i lalo ole siosiomaga GMP.E mafai ona faʻaitiitia le viscosity o le cell supernatant ma cell lysate i suʻesuʻega faʻasaienisi, faʻateleina le faʻamamaina o le polotini ma faʻaleleia suʻesuʻega faʻatino galuega.E mafai fo'i e le oloa ona fa'aitiitia toega o le nucleic acid i le pg-grade, fa'aleleia le fa'atinoga ma le saogalemu o mea fa'aola o fa'aoga e aofia ai le fa'amamaina o siama, gaosiga o tui, ma le gaosiga o vaila'au fa'apolotini/polysaccharide.E le gata i lea, e mafai foi ona faʻaogaina le oloa e puipuia ai le faʻapipiʻiina o sela mononuclear toto tagata (PBMC) i togafitiga sela ma le atinaʻeina o tui.
O loʻo tuʻuina atu le UltraNuclease i le tulaga o se faʻamaʻi faʻamaʻi, faʻafefe i totonu o le paʻu (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerin), faʻatasi ai ma foliga o se vai e leai se lanu, manino.O lenei oloa e gaosia e le GMP faʻagasologa manaʻomia ma tuʻuina atu i se vai.
Vaega
UltraNuclease GMP-vaega (250 U/μL)
Tulaga Teuteu
O le oloa e lafo i aisa mago ma e mafai ona teuina i le -25 ℃ ~ -15 ° C mo le lua tausaga.
Afai e tatala le oloa ma ua teuina i le 4 ℃ mo le sili atu ma le vaiaso, matou te fautuaina le faʻamamainale oloa e puipuia ai le faaleagaina o microbial.
Fa'amatalaga
| Fa'aaliga Host | Recombinant E. coli ma le UltraNuclease gene |
| Molecular Weight | 26.5 kDa |
| soelectric point | 6.85 |
| Mama | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Taofi Taofi | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerin |
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Fa'amatalaga Vaega | O le fa'amatalaga o le tasi Gaoioiga iunite (U) o le aofa'i o le enzyme e fa'aaogainasuia le aoga o le absorption o le ΔA260 ile 1.0 ile 30 minute ile 2.625 mLfaiga tali i le 37 ℃ ma le pH o le 8.0 (tutusa ma le faʻamaʻiina atoa o37 μg samoni sperm DNA i oligonucleotides). |
Faatonuga
1. Fa'ata'ita'iga Aoina
Selula pipii: aveese le ala, fufulu sela i le PBS, ma aveese le supernatant.
Suspension cells: aoina sela e ala ile centrifugation, fufulu sela ile PBS, centrifuge ile 6,000rpm mo le 10 min, aoina le pellet.
Escherichia coli: aoina le siama e ala ile centrifugation, fufulu tasi ile PBS, centrifuge ile 8,000rpm mo le 5 min, ma aoina le pellet.
2. Fa'ata'ita'iga Togafitiga
Togafiti pelleti sela ua aoina i le lysis buffer i le fua faatatau o le mamafa (g) i le voluma (mL)1: (10-20), poʻo le masini poʻo vailaʻau i luga o le aisa poʻo le vevela o le potu (1g o le pellet cell e aofia ai
109 sela).
3. Togafitiga Enzyme
Fa'aopoopo le 1-5mM MgCl ile faiga fa'afoliga ma fetu'una'i le pH ile 8-9.
Faʻaopoopo le UltraNuclease e tusa ai ma le fua faatatau o le 250 Unite e faʻafefe ai le 1 g o pellets cell, faʻafefe i le 37 ℃ mo le sili atu i le 30 minute.Fa'amolemole va'ai le fomu "Taimi Fa'atonu" e filifili ai leumi ole togafitiga.
4. Supernatant Aoina
Centrifuge ile 12,000 rpm mo le 30 minute ma aoina le supernatant.
Manatua: Afai ole vaifofo ole acidic po'o alkaline, pe o loʻo i ai le maualuga o le masima, vailaʻau faʻamaʻi, poʻodenaturants, faʻamolemole faʻateleina le enzyme dose pe faʻalautele le taimi togafitiga e tusa ai.
Fautuaina tulaga tali atuons
| Parameter | Tulaga sili ona lelei | Tulaga Lelei |
| Mg²+Fa'asa'o | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| vevela | 37℃ | 0-42 ℃ |
| DTT Concentration | 0-100 mM | >0 mM |
| Mercaptoethanol Concentration | 0-100 mM | >0 mM |
| Monovalent Cation Concentration | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Phosphate lon Concentration | 0-10 mM | 0-100 mM |
Fautuaina Tali Taimi (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Aofa'i UltraNuclease (Fa'ai'uga Fa'ai'uga) | Taimi o Tali |
| 0.25 U/mL | >10h |
| 2.5 U/mL | >4h |
| 25 U/mL | 30 min |
Fa'amatalaga:
Fa'amolemole fai le PPE e mana'omia, o se ofu su'esu'e ma totigilima, ia mautinoa lou soifua maloloina ma lou saogalemu!
