Rnase A
Ribonuclease A (RNaseA) o se polypeptide tasi-stranded o loʻo i ai faʻamauga 4 disulfide ma se mamafa mole e tusa ma le 13.7 kDa.RNase A ose endoribonuclease e fa'aleaga fa'aleaga RNA tasi-va'a ile C ma U toega.Aemaise lava, o le cleavage e iloa ai le fusi o le phosphodiester na faia e le 5'-ribose o se nucleotide ma le vaega phosphate i luga o le 3'-ribose o le nucleotide pyrimidine lata ane, ina ia hydrolyzed le 2, 3'-Cyclic phosphates i le 3 tutusa. 'nucleoside phosphates (eg pG-pG-pC-pA-pG e vavae e RNase A e maua ai le pG-pG-pCp ma le A-PG).O le RNase A e sili ona malosi i le tipiina o le RNA tasi.Fautuaina galuega fa'atonuga ole 1-100μG/mL, fetaui ma faiga tali eseese.E mafai ona fa'aogaina le fa'amama maualalo o le masima (0-100 mM NaCl) e tipiina ai le RNA e tasi, RNA fa'alua, ma filifili RNA na fausia e le RNA-DNA hybridization.Ae ui i lea, i le maualuga o le masima (≥0.3 M), o le RNase A naʻo le faʻapipiʻiina o le RNA e tasi.
RNase A e masani ona faʻaaogaina e aveese ai le RNA i le taimi o le sauniuniga o le plasmid DNA poʻo le genomic DNA. Pe o le DNase o loʻo galue i le faagasologa o sauniuniga e mafai ona faigofie ona aʻafia ai le tali.Ole auala masani ole fa'apuna ile vai taele e mafai ona fa'aoga e fa'agata ai le gaioiga ole DNase.O lenei oloa e le o iai le DNase ma le protease, ma e le manaʻomia togafitiga vevela aʻo leʻi faʻaaogaina.E le gata i lea, o lenei oloa e mafai foi ona faʻaaogaina i suʻesuʻega o meaola mole mole e pei ole suʻesuʻega o le puipuiga a le RNase ma le suʻesuʻeina o le RNA.
Tulaga Teuteu
E mafai ona teuina le oloa ile -25-15℃, aoga mo le 2 tausaga.
Faatonuga
Ole tasi lea o auala masani mo le saunia ole RNase A fofo teuina.E mafai foi ona saunia eisi metotia e tusa ai ma auala masani i totonu o fale suʻesuʻe poʻo tusi faʻasino (e pei osolo sa'o ile 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 po'o le Tris-NaCl solution)
1. Fa'aaoga le 10 mM sodium acetate (pH 5.2) e saunia ai le 10 mg/mL o le RNase A fofo e teu ai.
2. Fa'avevela ile 100 ℃ mo le 15 min
3. Fa'alili i le vevela o le potu, fa'aopoopo le 1/10 voluma o le 1 M Tris-HCl (pH 7.4), fetuunai lona pH i le 7.4 (mofa'ata'ita'iga, fa'aopoopo le 500 ml o le 10g/ml RNase fofo teuina 1M Tris-HCL, PH7.4)
4. Faʻapipiʻiina i lalo -20 ℃ mo le teuina o le aisa, lea e mafai ona faʻamautu mo le 2 tausaga.
[Faamatalaga]: A fa'apuna le vaifofo RNaseA i lalo o tulaga le tutusa, o le a fa'atupu le timu RNase;Faʻapala i se pH maualalo, ma afai o loʻo i ai le timuga, e mafai ona matauina, atonu e mafua mai i le i ai o le palatini le mama.Afai e maua le palapala pe a uma ona faʻapuna, e mafai ona aveese mea leaga e ala ile centrifugation maualuga (13000rpm), ona faʻapipiʻi lea mo le teuina o le aisa.
Fa'amatalaga o oloa
| Synonyms | Ribonuclease I;Pancreatic ribonuclease;Ribonuclease 3'-pyrimidnooligonucleotidohydrolase;Rnase A;Endoribonulcease I |
| CAS Nu. | 9001-99-4 |
| Fa'aaliga | Pa'u pa'epa'e lyophilized |
| mamafa mole | ~ 13.7kDa (faasologa ole amino acid) |
| Ph Taua | 7.6 (vaega o gaoioiga 6-10) |
| Suavai talafeagai | 60 ℃ (vaega o gaioiga 15-70 ℃) |
| Sui fa'agaoioia | Na2+.K+ |
| Taofi | Rnase Inhibitor |
| Auala le fa'agaoioia | E le mafai ona faʻaaogaina e ala i le faʻamafanafanaina, e fautuaina e faʻaaoga le koluma centrifuge |
| Amataga | Povine |
| Solubility | Solu i le vai (10mg/ml) |
| Ma'imau ile mago | ≤5.0% |
| Gaioiga ole enzyme | ≥60 iunite Kunitz/mg |
| Isoelectric point | 9.6 |
Fa'amatalaga
Mo lou saogalemu ma lou soifua maloloina, fa'amolemole fai ni ofu talaloa ma totigilima fa'aaoga mo le taotoga.
