Wild Taq DNA Polymerase
O le Taq DNA Polymerase ose DNA polymerase e mafai ona fa'afefeteina mai le Thermus aquaticus YT-1, o lo'o iai le 5′→3′ polymerase gaioiga ma le 5′ flap endonuclease gaioiga.
Vaega
| Vaega | HC1010A-01 | HC1010A-02 | HC1010A-03 | HC1010A-04 |
| 10 × Taq Faʻamau | 2×1 mL | 2×10 mL | 2×50 mL | 5×200 mL |
| Taq DNA Polymerase (5 U/μL) | 0.1 mL | 1 mL | 5 ml | 5×10 mL |
Tulaga Teuteu
Felauaiga i lalo ole 0°C ma ia teuina ile -25°C~-15°C.
Fa'amatalaga Vaega
O le tasi iunite o lo'o fa'amatalaina o le aofa'i o le enzyme e fa'aofia ai le 15 nmol o le dNTP i mea e le mafai ona fa'asalaina i totonu ole 30 minute ile 75°C.
Puleaina lelei
1.Su'esu'ega Fa'amama Polotini (SDS-PAGE):O le mama o le Taq DNA polymerase na ≥95% na fuafuaina e le SDS-PAGE suʻesuʻega.
2.EndGaoioiga onuclease:Ole la'ititi ole 5 U ole Taq DNA polymerase fa'atasi ma le 1 μg λDNA mo le 16 itula ile 37 ℃ e le maua ai se fa'aleagaina e pei ona fuafuaina.
3.Gaoioiga Exonuclease:Ole la'ititi ole 5 U ole Taq DNA polymerase ma le 1 μg λ -Hind Ⅲ digest DNA mo le 16 itula ile 37 ℃ e le maua ai se fa'aleagaina e pei ona fuafuaina.
4.Nickase Gaoioiga:Ole la'ititi ole 5 U ole Taq DNA polymerase fa'atasi ma le 1 μg pBR322 DNA mo le 16 itula ile 37°C e maua ai le leai o se fa'aleagaina e pei ona fa'amoemoeina.
5.RNase Gaoioiga:Ole la'ititi ole 5 U ole Taq DNA polymerase fa'atasi ma le 1.6 μg MS2 RNA mo le 16 itula ile 37°C e i'u ai i le leai o se fa'aleagaina e pei ona fuafuaina.
6.E. coliDNA:5 U o Taq DNA polymerase o loʻo suʻesuʻeina mo le iai o le E. coli genomic DNA e faʻaaoga ai TaqMan qPCR faʻatasi ai ma primers faʻapitoa mo le E. coli 16S rRNA locus.O le E. coli genomic DNA contamination e ≤1 Kopi.
7.Fa'aopoopoina PCR (5.0 kb Lambda DNA)- O le tali 50 µL o lo'o iai le 5 ng Lambda DNA ma le 5 iunite o le Taq DNA Polymerase mo ta'amilosaga 25 o le fa'alauteleina o le PCR e maua ai le 5.0 kb oloa fa'amoemoeina.
Seti Tali
| Vaega | Volume |
| DNA mamanua | faitalia |
| 10 μM Ulua'i Muamua | 1 μL |
| 10 μM Fa'aliliuga Muamua | 1 μL |
| dNTP Mix (10mM ta'itasi) | 1 μL |
| 10×Taq Fa'amau | 5 μL |
| Taq DNA Polymerasee | 0.25 μL |
| Vai e leai ni nuclease | E oʻo atu i le 50 μL |
Fa'amatalaga:
1) E ese le maualuga o le tali atu o mamanu eseese.O le siata o lo'o i lalo o lo'o fa'aalia ai le fa'aogaina o le fa'ata'ita'iga fautuaina o le 50 μL reaction system.
| DNA | Aofaiga |
| Genomic | 1 ng-1 μg |
| Plasmid poʻo Viral | 1 itulau-1 ng |
2) Ole fa'atonuga sili ona lelei ole Taq DNA Polymerase e mafai ona maua mai ile 0.25 μL~1 μL ile fa'aoga fa'apitoa.
TaliPolokalama
| Laa | vevela(°C) | Taimi | Ta'amilosaga |
| Uluai denaturationa | 95 ℃ | 5min | - |
| Denaturation | 95 ℃ | 15-30 s | 30-35 Ta'amilosaga |
| Fa'asusue | 60 ℃ | 15 s | |
| Fa'aopoopoga | 72 ℃ | 1kb/min | |
| Fa'aopoopo Mulimuli | 72 ℃ | 5min | - |
Fa'amatalaga:
1) O le tulaga muamua o le denaturation e talafeagai mo le tele o tali faʻateleina ma e mafai ona faʻaleleia e tusa ai ma le lavelave o le fausaga mamanu.Afai e lavelave le fausaga fa'ata'ita'iga, e mafai ona fa'alautele le taimi a'o le'i fa'amuta i le 5 - 10mins e fa'aleleia ai le a'afiaga muamua o le denaturation.
2) E manaʻomia ona fetuunaʻi le vevela faʻafefete e tusa ai ma le tau Tm o le faʻavae, lea e masani ona seti i le 3 ~ 5 ℃ maualalo ifo nai lo le tau Tm o le faʻavae;Mo faʻataʻitaʻiga lavelave, e manaʻomia le fetuunaʻi o le vevela o le annealing ma faʻalautele le taimi faʻalautele e ausia ai le faʻaleleia lelei.
