Multiplex Tasi Laasaga RT-qPCR Premix-UNG
Pusi Numera: HCB5145A
Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) o se pusa PCR numera tele e fa'avae ile RNA e fai ma fa'ata'ita'iga.I le fa'agasologa o le fa'ata'ita'iga, o le fa'aliliuina o le fa'aliliuga ma le PCR quantitative na fa'atinoina i totonu o le paipa lava e tasi, lea na fa'afaigofieina ai le fa'ata'ita'iga fa'ata'ita'iga ma fa'aitiitia ai le lamatiaga o le fa'aleagaina.I totonu o lenei pusa, o le vaega muamua o le cDNA na faʻapipiʻiina lelei e le Reverse Transcriptase e faʻasalaina vevela ma faʻateleina faʻateleina e HotStart Tag DNA Polymerase.O le pusa o lo'o aofia ai le fa'aogaina lelei o le MP, fa'afefiloi enzymes, ma isi2+ma le dNTP.E le gata i lea, o mea taua e mafai ona faʻamalosia lelei ai le faʻalauteleina o le PCR e le faʻapitoa ma faʻaleleia le faʻaleleia atili o le tele o tali qPCR e faʻaopoopoina, lea e mafai ona faʻamautinoa ai le faʻamalosia lelei ma faʻataunuʻuina i luga o le tele o faʻasalalauga.O le dUTP/UDG system na fa'aopoopoina e puipuia lelei ai le lamatiaga o le fa'aleagaina o le ea.
Vaega
1. Puipui
2. Fa'afefiloi Enzyme
Fa'amatalaga
| Amata vevela | Fa'atosina vevela amata |
| Su'esu'ega auala | Su'esu'ega muamua |
| auala PCR | Tasi le laasaga RT-qPCR |
| Polymerase | Taq DNA polymerase |
| Ituaiga fa'ata'ita'iga | DNA |
Tulaga Teuteu
O le oloa e lafo i aisa mago ma e mafai ona teuina i le -25 ~ -15℃ mo le 1 tausaga.E tatau ona aloese mai le faia soofa'aisa-liliu.E fautuaina e teu eseese.
Faatonuga
1.Tali Faiga
| Vaega | Volume (μL) | Fa'ai'uga Fa'amau |
| 2 × MP Puipui | 12.5 | 1× |
| Enzyme Mix | 1 | - |
| Fa'afefiloi Muamua/Su'esu'e (2.5 μM) | 3 | 0.3μM |
| Fa'ata'ita'iga RNA | 1-10 | - |
| RNase Free H2O | i le 25 | - |
Fa'amatalaga:
Ia mautinoa e faʻafefiloi lelei aʻo leʻi faʻaaogaina, aloese mai le faʻafefe tele e mafua mai i le vevesi malosi.
a.Fa'atonuga muamua: Fa'afefiloi muamua e aofia ai le fa'atosina tele, e fa'atatau i le tulaga e sili ona lelei le fa'aogaina muamua atonu i le va o le 0.l ma le 1.0μM.
e.Fa'atonuga ole su'esu'ega: Fa'afefiloiga su'esu'e e aofia ai le fa'ailogaina ole tele ole va'aiga ole va'aiga ole va'aiga ole 0.05μM.
i.Fa'aliga fa'ata'ita'iga: qPCR e matua ma'ale'ale ma e fautuaina e fa'amama le fa'ata'ita'iga.Ole tau ole pulea ole Ct e talafeagai ile va ole 20 ma le 35.
o.Sauniuniga faiga: Fa'amolemole saunia i le laulau galue mama ultra, ma pipettor ma tali faagaau e aunoa ma le nuclease toega;e fautuaina e faʻaaoga le ulu o le fana ma le elemene faamama.'Alo'ese mai le fa'a'ese'ese ma le aerosol.
2. Fa'alelei le uila vilivaePolokalama
| Ta'amilosaga laa | Temp. | Taimi | Ta'amilosaga |
| Fa'aliliuga fa'aliliuga | 50℃a | 20 minute | 1 |
| Uluai-denaturation | 95℃ | 5min | 1 |
| Tali fa'atuputeleina | 95℃ | 15sec |
40-45 |
| 60℃ b | 30sec c |
Fa'amatalaga:
a.Fa'aliliuga fa'aliliuga: E mafai ona filifili le vevela 42°C po'o le 50°C.
e.Fa'atelega tali: E fetu'una'i le vevela e tusa ai ma le tau Tm o fa'avae ua fuafuaina.
i.Mauaina faʻailoga faʻafefe: Faʻamolemole seti le faʻataʻitaʻiga faʻataʻitaʻiga e tusa ai ma manaʻoga o le tusi lesona meafaigaluega.
Fa'amatalaga
Fa'amolemole fai le PPE talafeagai, e pei o le ofu su'esu'e ma totigilima, ina ia mautinoa lou soifua maloloina ma le saogalemu.
