Tasi Laasaga RT-qPCR SYBR Green Premix
Pusi Numera: HCB5140A
Tasi le Laasaga RT-qPCR Syber Green Premix e mo le fuaina o le fluorescence e faavae ile SYBR Green I vali.O le faʻaaogaina o mea faʻapitoa faʻapitoa, faʻaliliuga faʻaliliu ma tali qPCR e faʻamaeʻaina i le tasi paipa, faʻaumatia le manaʻoga mo le toe tatalaina o le pulou ma le paipa, faʻaleleia atili le lelei o suʻega ma faʻaitiitia le lamatiaga o le faʻaleagaina.Mo fa'ata'ita'iga RNA, o lo'o fa'aaogaina e le pusa le Reverse Transcriptase e fa'asa'o le vevela mo le fa'aogaina lelei o le cDNA ma le HotStart Taq DNA Polymerase mo le fa'ateleina fa'atele.I lalo o le faiga fa'apolopolo sili, o le maaleale o le pusa e mafai ona maualuga e pei o le 0.1 pg mo sini fa'aalia maualuga ma maualuga e o'o i le 1 pg mo sini fa'aalia lelei.O le pusa e fetaui lelei mo le faʻalauteleina ma le faʻatusatusaina o faʻataʻitaʻiga DNA.E mafai ai ona su'esu'eina ma'ale'ale ma fa'atatauga ole nucleic acids mai la'au ma manu fa'ata'ita'i eseese, sela ma microorganisms.
Vaega
| No | Igoa | Volume | Volume |
| 1 | Avatu maualuga | 250 μL | 2×1.25 mL |
| 2 | Fa'afefiloi Enzyme Maualuga | 20 μL | 200 μL |
| 3 | RNase Free H2O | 250 μL | 2×1.25 mL |
Tulaga Teuteu
O lenei oloa e tatau ona teuina i le -25 ~ -15 ℃ ese mai le malamalama mo le 1 tausaga.
Faatonuga
1.Reaction system configurationd
| Vaega | Volume (μL) | Volume (μL) | Fa'atonuga mulimuli |
| Avatu maualuga | 12.5 | 25 | 1× |
| Fa'afefiloi Enzyme Maualuga | 1 | 2 | - |
| Fa'amuamua (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| Fa'ata'ita'i (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| RNA Tamplateb | X | X | - |
| RNase Free H2Oc | i le 25 | i le 50 | - |
Fa'amatalaga:
1) a.To lona fa'ai'uga fa'ai'uga muamua o le 0.2 μmol/L, lea e mafai fo'i ona fetu'una'i i le va o le 0.1 ma le 1μmol/L pe a talafeagai ai.
2) e.O le reagent e matuaʻi maʻaleʻale, ma le Aofaʻi RNA i le va o le 1pg-1μg, ma le suʻega o faʻataʻitaʻiga a tagata na faʻaalia ai se faʻaoga sili ona lelei o le 1 pg-100 ng, pulea mo le aofaʻi atoa o le Ct i le va o le 15-30 pe a talafeagai.
3) i.E fautuaina e faʻaaoga le 20μL poʻo le 50μL e faʻamautinoa ai le faʻamaonia ma le toe faʻaleleia o le faʻalauteleina o le kenera.
4) o.Fa'amolemole sauni i totonu o le nofoa fa'amama ma fa'aaoga fautuaga e leai ni mea e totoe ma fa'agaau tali;fautuaga fa'atasi ai ma pusa fa'amama e fautuaina.'Alo'ese mai le fa'a'ese'ese ma le aerosol.
2.Polokalama tali
| Laasaga taamilo | Temp. | Taimi | Ta'amilosaga |
| Fa'aliliuga fa'aliliuga | 50℃a | 6min | 1 |
| Uluai denaturation | 95℃ | 5min | 1 |
| Tali fa'atuputeleina | 95℃ | 15 sec | 40 |
| 60℃b | 30 sec | ||
| La'asaga pi'o liusuavai | Meafaigaluega Fa'aletonu | 1 | |
Fa'amatalaga:
1) a.E mafai ona filifilia le vevela fa'aliliuga i le va o le 50-55°C e tusa ai ma mana'oga fa'ata'ita'i.Mo fa'ata'ita'iga DNA, e mafai ona 'ave'esea le fa'asologa o fa'aliliuga i tua.
2) e.I ni tulaga fa'apitoa e mafai ona fetu'una'i le vevela o le fa'amama/fa'aopoopo e tusa ai ma le tau Tm muamua, 60°C ua fautuaina.
Fa'amatalaga
1. O lenei oloa e mo na'o su'esu'ega.
2. Fa'amolemole fa'agaioi i ofu su'esu'e ma totigilima lafoa'i, mo lou saogalemu.
