Bst 2.0 DNA Polymerase(Glycerol free)
Bst DNA polymerase V2 e maua mai le Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I, o loʻo i ai le 5′→3′ DNA polymerase activity ma le malosi o le suiina o filifili, ae leai se 5′→3′ exonuclease.Bst DNA Polymerase V2 e fetaui lelei mo le strand-displacement, isothermal amplification LAMP (Loop mediated isothermal amplification) ma le faasologa vave.
Vaega
| Vaega | HC5005A-01 | HC5005A-02 | HC5005A-03 |
| BstDNApolymerase V2(Glycerol-free)(8U/μL) | 0.2 mL | 1 mL | 10 ml |
| 10×HC Bst V2 Pa'u | 1.5 mL | 2×1.5 mL | 3×10 mL |
| MgSO4(100mM) | 1.5 mL | 2×1.5 mL | 2×10 mL |
Talosaga
1. LAMP isothermal amplification
2.DNA strand tasi displacement tali
3. High GC gene sequencing
4.DNA sequencing o tulaga nanogram.
Tulaga Teuteu
Felauaiga i lalo ole 0°C ma ia teuina ile -25°C~-15°C.
Fa'amatalaga Vaega
E tasi le iunite o lo'o fa'amatalaina o le aofa'i o le enzyme e fa'aofia ai le 25 nmol o le dNTP i mea e le mafai ona fa'asalaina i totonu ole 30 minute ile 65°C.
Puleaina lelei
1.Su'esu'ega Fa'amama Polotini (SDS-PAGE):O le mama o le Bst DNA polymerase V2 e ≥99% e fuafuaina e le SDS-PAGE suʻesuʻega e faʻaaoga ai le Coomassie Blue detection.
2.Gaoioiga Exonuclease:Incubation o se tali 50 μL o loʻo i ai le itiiti ifo o le 8 U o le Bst DNA polymerase V2 ma le 1 μg λ -Hind Ⅲ digest DNA mo le 16 itula i le 37 ℃ e maua ai le leai o se faʻaleagaina e pei ona fuafuaina.
3.Nickase Gaoioiga:Incubation o le 50 μL faʻaalia o loʻo i ai le itiiti ifo o le 8 U o le Bst DNA polymerase V2 ma le 1 μg pBR322 DNA mo le 16 itula i le 37 ° C e maua ai le leai o se faʻaleagaina e pei ona fuafuaina.
4.RNase Gaoioiga:Incubation o se 50 μL faʻaalia o loʻo i ai le itiiti ifo o le 8 U o le Bst DNA polymerase V2 ma le 1.6 μg MS2 RNA mo le 16 itula i le 37 ° C e maua ai le leai o se faʻaleagaina e pei ona fuafuaina.
5.E. coli DNA:120 U o Bst DNA polymerase V2 o loʻo suʻeina mo le iai o le E. coli genomic DNA e faʻaaoga ai TaqMan qPCR faʻatasi ai ma faʻamatalaga faʻapitoa mo le E. coli 16S rRNA locus.O le E. coli genomic DNA contamination e ≤1 Kopi.
LAME Tali
| Vaega | 25μL |
| 10×HC Bst V2 Pa'u | 2.5 μL |
| MgSO4 (100mM) | 1.5 μL |
| dNTPs (10mM ta'itasi) | 3.5 μL |
| SYTO™ 16 Green (25×)a | 1.0 μL |
| Fa'afefiloi muamuab | 6 μL |
| Bst DNA Polymerase V2 (Glycerol-free) (8 U/uL) | 1 μL |
| Fa'ata'ita'iga | × μL |
| ddH₂O | E oʻo atu i le 25 μL |
Fa'amatalaga:
1) a.SYTOTM 16 Green (25 ×): E tusa ai ma manaʻoga faʻataʻitaʻiga, e mafai ona faʻaaogaina isi vali e fai ma sui;
2) e.Fa'afefiloi muamua: maua i le fa'afefiloiina o le 20 µ M FIP, 20 µ M BIP, 2.5 µ M F3, 2.5 µ M B3, 5 µ M LF, 5 µ M LB ma isi voluma.
Tali ma Tulaga
1 × HC Bst V2 Buffer, o le vevela o le incubation e i le va o le 60°C ma le 65°C.
Fa'aleaogaina o le vevela
80 °C, 20 minute
